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金银花植体灭菌方法

导读:近年来金银花的需求量不断上升,价格呈现攀高的趋势,金银花种苗价格也不断升高。大田生产中大多通过扦插和分根等方式进行繁殖,但品质却不断下降。如何快速得到大批量、高品


返回列表 来源:未知 发布日期:2019-05-28 11:24【
上海申安医疗器械厂浅谈对金银花的灭菌,金银花有抑菌抗炎,抗氧化等多种生理活性,有清热解毒、治疗热毒血痢、痈疽疔毒的功效。由于忍冬繁殖能力强,对土壤和气候的选择并不严格,全国各地均有种植,目前在大田生产中主要以扦插和分根繁殖为主。由于近年来金银花价格走势不断上升,运用范围不断拓宽,药农对金银花的关注度更是增高。植物组织培养是指在无菌环境下,利用植物离体的细胞,组织或器官在人工培养的条件下生成新的植物体的过程。

组织培养能在较
短的时间内繁殖出大量的植株,有快速、高效的作用。同时,对于金银花等容易携带病毒,易于退化的植物来说,组织培养可以保持其亲本的优良性状,维持良好品质。在组织培养过程中,面临的主要问题之一便是外植体的杂菌感染,如何将外植体进行有效的灭菌,从而得到大批量无菌苗,应用于大田生产,得到量大、价低且品质好的金银花品种是我们一直努力的方向。
 
由于金银花外被疏绒毛和疏腺毛,灭菌较为困难。在灭菌剂中加入适量的氢氧化钠,可增大灭菌剂与金银花表面的接触面积,提高灭菌率。在实验中我们发现,乙醇浓度低,灭菌时间短都可能造成灭菌不彻底,污染率就相应增高,乙醇浓度过高,灭菌时间增长则使外植体褐化率增高,成活率降低,而氢氧化钠的浓度过高则过分破坏了金银花表面,使其褐化率增高。处理时间的极差值最高为1.314,为四个因素中最重要因素。本实验中最适处理时间为30s。实验五中氢氧化钠的质量分数为1.0%,处理时间为30s,乙醇的浓度为75.0%,温度为25℃时外植体污染率和褐化率较低,成活率最高,为最优灭菌方法。
 
金银花外植体灭菌方式多种多样,外被疏绒毛、疏腺毛等特征,使得灭菌方法与其他植物相比有所不同。试剂处理后最佳灭菌方式为浓度75.0%乙醇与质量分数1.0%氢氧化钠混合形成碱化乙醇处理30s加质量分数0.1%氯化汞处理7min得到污染率5.0%,成活率88.3%的处理方式。考虑到大田生产的成本问题,0.1%的氯化汞处理7min则更为合适。同时,本实验中最优灭菌方法为在含有纳米银的b型培养基上接种经无菌水冲洗干净的外植体,可以达到98.7%的灭菌率,96.7%的成活率。随着科技的发展,试验水平和仪器设备标准的提升,无菌处理以及组织培养技术将会达到一个更高的水平。
以上内容仅供参考。